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阿米舒必利-雞卵清白蛋白偶聯(lián)物的免疫活性檢測方法的原理是什么?

2024-10-09 [51]

阿米舒必利-雞卵清白蛋白偶聯(lián)物|Amisulpride-Ovalbumin Conjugate(Amisulpride-OVA Conjugate)

阿米舒必利 - 雞卵清白蛋白偶聯(lián)物的免疫活性檢測方法通常采用免疫分析技術(shù),如酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)等,其原理如下:

 

一、基本原理

抗原抗體特異性結(jié)合

阿米舒必利 - 雞卵清白蛋白偶聯(lián)物作為一種抗原,能夠與樣本中特異性的抗體發(fā)生結(jié)合。這種結(jié)合是高度特異性的,即只有針對阿米舒必利或偶聯(lián)物上特定表位的抗體才能與之結(jié)合。

例如,在檢測動物血清中是否存在針對阿米舒必利的抗體時,若血清中含有該抗體,就會與偶聯(lián)物上的阿米舒必利或雞卵清白蛋白上因偶聯(lián)而產(chǎn)生的新表位發(fā)生特異性結(jié)合。

檢測系統(tǒng)產(chǎn)生可檢測信號

通過與特定的檢測系統(tǒng)結(jié)合,產(chǎn)生可檢測的信號,從而實現(xiàn)對結(jié)合反應(yīng)的定量或定性分析。

 

二、以酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)為例

包被

將阿米舒必利 - 雞卵清白蛋白偶聯(lián)物包被在固相載體(如酶標板)表面。通常通過物理吸附或化學(xué)結(jié)合的方式,使偶聯(lián)物牢固地固定在載體上。

封閉

加入封閉液,封閉載體表面未結(jié)合偶聯(lián)物的位點,以減少非特異性結(jié)合。常用的封閉液有牛血清白蛋白、脫脂奶粉等蛋白質(zhì)溶液。

加樣

加入待檢測的樣本(如血清、血漿等)。如果樣本中含有針對阿米舒必利或偶聯(lián)物的抗體,這些抗體就會與包被在載體上的偶聯(lián)物結(jié)合。

洗滌

用洗滌液洗去未結(jié)合的物質(zhì),包括未結(jié)合的抗體和其他雜質(zhì),以降低背景信號,提高檢測的特異性。

加酶標二抗

加入與一抗(樣本中的抗體)特異性結(jié)合的酶標二抗。二抗通常是用酶(如辣根過氧化物酶或堿性磷酸酶)標記的,能夠與一抗結(jié)合,并且攜帶酶分子。

洗滌

再次洗滌,去除未結(jié)合的酶標二抗。

加底物

加入酶的底物。根據(jù)酶的種類不同,底物會在酶的催化下發(fā)生顏色變化、產(chǎn)生發(fā)光等信號。

檢測信號

使用酶標儀等設(shè)備檢測反應(yīng)產(chǎn)生的信號強度。信號強度與樣本中抗體的含量成正比,通過與標準曲線比較,可以確定樣本中抗體的濃度,從而間接反映阿米舒必利 - 雞卵清白蛋白偶聯(lián)物的免疫活性。

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