
基本信息
中文名稱:活性酯生物素交聯(lián)劑
英文名稱:NHS-LC-Biotin
CAS:72040-63-2
狀態(tài):固體/粉末
儲藏條件:冷藏-20℃
純度:95%
結構式:
描述
NHS-LC-Biotin是一種常用的化學試劑,常用于生物化學和分子生物學研究中。它是由N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)酯化生物素(Biotin)得到的一種活性酯化合物。NHS-LC-Biotin能夠與含有伯胺基團的分子(如蛋白質、多肽等)發(fā)生反應,形成穩(wěn)定的酰胺鍵,從而將生物素標記到目標分子上。
### 主要特點和應用
1. 標記蛋白質和多肽:NHS-LC-Biotin可以用來標記含有伯胺基團的蛋白質和多肽。這種標記方法廣泛應用于蛋白質相互作用研究、蛋白質親和純化以及蛋白質檢測等領域。
2. 長鏈連接臂:NHS-LC-Biotin中的“LC"代表長鏈(Long Chain),指的是其具有一個較長的柔性連接臂。這個長鏈連接臂有助于減少生物素標記對目標分子功能的影響,保持標記后的蛋白質或多肽的生物活性。
3. 高反應性和選擇性:NHS-LC-Biotin在適當?shù)?/span>pH條件下具有很高的反應性,能夠迅速與伯胺基團反應。同時,由于其特定的反應基團,它可以實現(xiàn)高度選擇性的標記。
4. 生物素親和純化:標記了NHS-LC-Biotin的蛋白質可以通過親和純化技術進行分離和純化。這是因為生物素能夠與親和素(Avidin)或鏈霉親和素(Streptavidin)高度特異性結合,這些蛋白對生物素具有較高的親和力。
### 使用注意事項
1. 溶解和儲存:NHS-LC-Biotin通常需要在無水的有機溶劑(如DMF或DMSO)中溶解,并且應儲存在干燥、避光的環(huán)境中,以防止降解和氧化。
2. 反應條件:標記反應通常在pH 7-9的緩沖液中進行,過低或過高的pH都會影響反應效率和標記效果。
3. 去除未反應的試劑:在標記反應完成后,應通過透析、凝膠過濾或其他方法去除未反應的NHS-LC-Biotin,以避免非特異性結合和背景干擾。
4. 生物素化程度:標記過程中應控制好生物素化程度,過高或過低的生物素化都可能影響目標分子的功能和活性。
### 應用實例
- 蛋白質相互作用研究:利用NHS-LC-Biotin標記目標蛋白質,然后通過親和純化和質譜分析,鑒定與其相互作用的蛋白質。
- 蛋白質檢測:通過生物素標記的抗體,結合親和素或鏈霉親和素偶聯(lián)的酶或熒光染料,實現(xiàn)對目標蛋白質的高靈敏度檢測。
- 蛋白質親和純化:利用生物素標記的目標蛋白質,通過親和層析柱進行純化,獲得高純度的蛋白質樣品。
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